Western blot測試,也稱為免疫印跡,是對蛋白質混合物中特定蛋白質的測試。蛋白質印跡試驗是在凝膠電泳或酶聯免疫吸附測定(ELISA)試驗后進行的,它使用抗體來鑒定特定的蛋白質。
十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是用于分離蛋白質以進行蛋白質印跡的常用測試。當蛋白質通過凝膠基質時,蛋白質按重量和電特性分開。
ELISA測試使用附著在固體表面上的酶或抗體來創建測試表面。然后將樣品添加到測試表面。與蛋白質反應或附著的抗體或酶顯示陽性結果。
在凝膠電泳后進行蛋白質印跡測試。分離出的蛋白質被轉移(或印跡)到硝酸纖維素膜或尼龍膜上,并通過被二級蛋白質標記的特異性抗體進行鑒定。
Western印跡測試用于確認凝膠電泳或ELISA測試的陽性結果。Western blot檢測可以更特異性地鑒定蛋白質,并可以排除假陽性。
Western blot檢測通常用于確認人類免疫缺陷病毒(HIV)和萊姆病的陽性檢測結果。